ApoE敲除小鼠制作动脉粥样硬化模型鼠来

动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是冠心病、脑梗死、外周血管病的主要原因。其特点是受累动脉病变从内膜开始，一般先有脂质和复合糖类积聚、出血及血栓形成，进而纤维组织增生及钙质沉着，并有动脉中层的逐渐蜕变和钙化，导致动脉壁增厚变硬、血管腔狭窄。病变常累及大中肌性动脉，一旦发展到足以阻塞动脉腔，则该动脉所供应的组织或器官将缺血或坏死。

图1.动脉粥样硬化形成过程示意图

动脉粥样硬化是多因素共同作用引起的，发病机制复杂，目前尚未完全阐明。主要危险因素有高血压、高血脂和大量吸烟，还有糖尿病、肥胖和遗传因素等。

流行病数据显示动脉粥样硬化导致的死亡率居高不下，很多研究人员为了攻克这个疾病做了大量研究。为模拟人类的动脉粥样硬化疾病，研究人员常用ApoE(apolipoproteinE,载脂蛋白E)敲除(ApoEKO)小鼠和Ldlr(lowdensitylipoproteinreceptor,低密度脂蛋白受体)敲除(LdlrKO)小鼠来制作动物模型。

表1.ApoE敲除小鼠和Ldlr敲除小鼠各指标对比

接下来为大家详细介绍下ApoE敲除小鼠制作动脉粥样硬化模型的原理、方法、检测指标。

原理：

ApoE是极低密度脂蛋白(verylow-densitylipoprotein,VLDL)和高密度脂蛋白(high-densitylipoprotein,HDL)的组成部分，参与胆固醇的运输。和人的脂蛋白谱相反，小鼠体内HDL较高，而低密度脂蛋白(low-densitylipoprotein,LDL)含量较低，其胆固醇主要存在于HDL中。敲除ApoE基因后，胆固醇转而主要分布于VLDL中，其携带的大量胆固醇无法被细胞表面脂蛋白受体结合后降解，发生蓄积导致动脉粥样硬化。研究表明ApoE-/-小鼠可自发形成高胆固醇血症(-mg/dL)，并在正常饮食条件下发生显著的动脉粥样硬化病变。而高脂肪/高胆固醇的致动脉粥样硬化饮食会使血浆胆固醇水平升高超过mg/dL，加速动脉粥样硬化进程。此类小鼠的病变部位主要发生于主动脉根部、主动脉弓、无名动脉、主动脉分支及肾动脉分叉。

方法：

动物：ApoE敲除小鼠、5周龄、雄性

饲料：常用DC或DB

造模过程：

适应性喂养一周；

小鼠禁食一晚；

更换成DC或DB饲料；

继续饲养12周，期间每3天更换一次饲料；

12周后解剖小鼠即可观察到动脉粥样硬化形成

检测指标：

主动脉大体油红O染色；

主动脉根部做冰冻切片后油红O染色、Masson染色、天狼星红染色、免疫荧光染色（α-SMA和CD68等）；

血清生化指标检测：TC、TG、HDL、LDL含量

图2.主动脉大体油红O染色

图3.主动脉根部HE、Masson、油红O、免疫荧光染色（α-SMA和CD68）

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